Книга содержит изложение более 30 методов современной экспериментальной биологии, активно используемых при исследовании растений. Подробно рассмотрены методы генной инженерии и биоинформатики, функциональной геномики, белковой химии и гистохимии, методы изучения биологически активных соединений и трансдукции сигналов, а также биологии клетки и анализа субклеточных структур. Ряд методов был разработан или модифицирован самими авторами статей, специалистами Института физиологии растений и других институтов РАН. Структура и способ изложения материала максимально облегчают задачу освоения того или иного метода, помогают избежать ошибок в ходе эксперимента и корректно интерпретировать полученные результаты. Многие описанные методы широко применяются как при изучении растительных объектов, так и объектов других царств живых организмов. Данный сборник будет способствовать грамотному использованию наиболее современных методов исследования в практике отечественной биологической науки.br/Для студентов, аспирантов, научных сотрудников, проводящих фундаментальные или прикладные исследования в области биологии растений и сельского хозяйства.

Предисловие......3ГЛАВА 1. МЕТОДЫ ГЕННОЙ ИНЖЕНЕРИИ И БИОИНФОРМАТИКИ......51.1. Получение трансгенных растений методом агробактериальной трансформации. Г. Н. Ралдугина
С. А. Данилова
Н. О. Юрьева......51.2. Получение транспластомных растений табака методом баллистической трансформации. С. А. Данилова......261.3. Генетически трансформированные корни как модельная система для изучения физиологических и биохимических процессов корневой системы целого растения. И. Н. Кузовкина
М. Ю. Вдовитченко......371.4. Применение конструкций ДНК с репортерными генами в физиологии растений. Г. А. Романов......531.5. Инсерционные мутанты Arabidopsis thaliana и их использование для изучения функции гена. А. В. Демиденко......661.6. Полимеразная цепная реакция. Стратегия подбора праймеров для анализа экспрессии генов. Е. А. Лысенко......751.7. Сравнение последовательностей ДНК и белков. Е. А. Лысенко......96ГЛАВА 2. МЕТОДЫ АНАЛИЗА ГЕНОМА И ЕГО ЭКСПРЕССИИ......1092.1. Саузерн-блот-гибридизация. Д. В. Беляев......1092.2. Применение гидрогелевых биочипов для идентификации генно-модифицированных источников. Д. А. Грядунов
И. А. Гетман
Г. А. Романов......1202.3. Определение относительного количества транскриптов растительных генов методом нозерн-блот-гибридизации. Я. О. Зубо
М. В. Ямбуренко......1362.4. Изучение регуляции экспрессии растительных генов с использованием метода run-on транскрипции. Я. О. Зубо
М. В. Ямбуренко
В. В. Кузнецов......1472.5. Определение относительного содержания транскриптов генов растений с помощью ОТ-ПЦР. А. К. Кравцов
В. В. Кузнецов......1582.6. Исследование транскрипции генов с помощью ДНК микрочипов. Д. А. Лось......1672.7. ПЦР в режиме реального времени на аппаратах отечественного производства. Г. А. Романов
Л. И. Патрушев......1732.8. QTL-анализ и его применение в физиологических исследованиях. Л. И. Сергеева......185ГЛАВА 3. МЕТОДЫ БЕЛКОВОЙ ХИМИИ И ГИСТОХИМИИ......2013.1. Количественное определение содержания белка. И. Е. Мошков
Н. С. Степанченко
Г. В. Новикова......2013.2. Разделение белков при помощи электрофореза в присутствии додецилсульфата натрия и двумерный электрофорез. Г. В. Новикова
Н. С. Степанченко
И. Е. Мошков......2123.3. Вестерн-блот-гибридизация. Е. С. Пожидаева......2283.4. Экспрессия целевых (рекомбинантных) белков в бактериях. Е. С. Пожидаева......2413.5. Гистохимическая (in situ) локализация активности ферментов углеводного метаболизма в растительных тканях. Л. И. Сергеева......2563.6. Гистохимические методы определения локализации тяжелых металлов и стронция в тканях высших растений. И. В. Серегин
А. Д. Кожевникова......268ГЛАВА 4. МЕТОДЫ ИЗУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ И ТРАНСДУКЦИИ СИГНАЛОВ......2814.1. Количественное определение в растениях ИУК
цитокининов
абсцизовой кислоты и гиббереллинов иммуноферментным методом (ELISA). Л. М. Котова
А. А. Котов......2814.2. Количественное определение индолил-3-уксусной кислоты
абсцизовой кислоты и галоидфеноксикислот в одном образце растительной ткани. В. В. Карягин
В. Ю. Ракитин
В. Л. Садовская......3164.3. Определение выделения и содержания этилена в растениях. В. Ю. Ракитин
Т. Я. Ракитина......3234.4. Определение свободных и связанных полиаминов в растениях методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. В. Ю. Ракитин
О. Н. Прудникова
Л. А. Стеценко
Н. И. Шевякова......3374.5. Методы оценки содержания активных форм кислорода
низкомолекулярных антиоксидантов и активностей основных антиоксидантных ферментов. Н. Л. Радюкина
Ю. В. Иванов
Н. И. Шевякова......3474.6. Анализ гормон-рецепторного взаимодействия радиолигандным методом. С. Н. Ломин......3654.7. Применение трансгенных бактерий для изучения мембранных рецепторов. Г. А. Романов......377ГЛАВА 5. МЕТОДЫ БИОЛОГИИ КЛЕТКИ И АНАЛИЗА СУБКЛЕТОЧНЫХ СТРУКТУР......3865.1. Методы оценки и характеристики роста культур клеток высших растений. А. М. Носов......3865.2. Протопласты клеток растений как объект для физиологических
биохимических
молекулярных и генетических исследований. А. В. Носов
Т. А. Шевырёва
М. С. Трофимова
О. И. Соколов
Е. Б. Глоба
А. А. Фоменков
И. Н. Смоленская......4035.3. Определение параметров водного статуса растительных клеток с помощью внутриклеточного зонда давления. А. Б. Мещеряков
В. П. Холодова......4245.4. Определение основных характеристик водного баланса растений — водного и осмотического потенциала и тургора — методом термопарной изопиестической психрометрии. А. А. Котов
Л. М. Котова......4335.5. Методы выделения митохондрий растений и определения их интактности. А. Г. Шугаев
Д. А. Лаштабега
Н. С. Белозерова
И. П. Генерозова......4485.6. Получение плазмалеммы методом разделения микросомальных мембран в водной двухфазной полимерной системе. М. С. Трофимова
Т. А. Шевырева
И. М. Жесткова
С. Н. Ломин......4565.7. Количественная экстракция полярных липидов из растительного материала. В. Д. Цыдендамбаев
А. Г. Верещагин......466